男性不育?Y染色体可能微缺失,也可能发生重排
10月28日“世界男性健康日”,主题是关注男性健康,关注男性生殖健康。法医物证室2015年开展了Y染色体AZF区微缺失异常的检测,积极帮助男性不育患者查找病因,解决不育家庭生育问题;至今已检测上千例样本,为临床辅助生殖提供了科学的指导和诊断依据。
Y染色体AZF区
Y染色体长臂无精子症因子(azoospermia factor,AZF)微缺失是男性不育常见因素,仅次于克氏综合征。AZF区分为AZFa、AZFb、AZFc三个区。常见四种缺失类型:
1. AZFa区缺失,占比为0.5%~4%,缺失导致无精子症;
2. AZFb区缺失,占比为1%~5%,缺失导致无精子症;
3. AZFbc区缺失,占比为1%~3%,缺失导致无精子症;
4.AZFc区缺失,占比为80%,常导致少精或弱精;
AZFc区有b2/b4、b1/b3、b2/b3、gr/gr四类亚型,其中b2/b4、gr/gr最常见;b2/b4缺失,可导致精子发生障碍的风险高达145倍。gr/gr缺失的致病性仍有争议,其缺失的频率和表型效应在不同种族之间有显著的差异。
Y染色体AZF区的检测- STS-PCR技术
序列标记位点的聚合酶链式反应技术(PCR of sequence-tagged site,STS-PCR)是目前临床常用的AZF区微缺失检测技术,该技术能检测6个STS位点 :
AZFa区的SY84、SY86位点
AZFb区的SY127、SY134位点
AZFc区的SY255、SY254位点
但是该技术不能深入分析AZF区拷贝数变异,特别是 AZFc区gr/gr缺失及复杂的重排等变异。在2023年,法医物证室高慧在《中华医学遗传学杂志》发表了《精子发生障碍患者Y染色体AZF区拷贝数变异分析》文章,其收集2016年1月至2022年10月就诊于best365网页版登录的就诊于深圳市人民医123例精子发生障碍患者及100例精液正常的男性,应用多重连接探针扩增技术(multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)检测其AZF区,深入分析AZF区的拷贝数变异(copy number variation,CNV)与男性精子发生障碍的关系。
Y染色体AZF区的检测-MLPA技术
MLPA技术中P360试剂盒(荷兰MRC-Holland公司)包含55个探针,其中12个位于常染色体,作为内部对照探针,43个位于Y染色体AZF区(AZFa、AZFb和AZFc检测探针分别为16、15和12个)。在研究中, 223例受试者中检出19种CNV,其中重复(7例)、AZFc区的gr/gr缺失(14例)及6种复杂重排(17例),应用常规的 STS-PCR技术均无法检测。
图:复杂重排为gr/gr缺失×2合并b2/b4重复×1,gr/gr缺失×3合并b2/b4重复×2等等。
Y染色体AZF区的CNV与男性精子发生障碍的关系
1. AZFa区与AZFb区的CNV对男性的精子发生有严重的影响,但AZF a区部分缺失对男性的精子发生影响较小,可能不会影响男性不育,需进一步检查,判读缺失片段的大小,才能进一步确诊。
2. AZFc区的b2/b4缺失与复杂重排等CNV影响男性精子发生,可认为是男性不育的风险因子。
3. AZFc区gr/gr缺失无统计学意义,在正常男性中均可见,故gr/gr缺失不能作为深圳地区男性不育的风险因子。
综上分析了Y染色体AZF区CNV,了解到临床STS-PCR技术检测分析 AZF区微缺失的6个STS位点的局限性。6个STS位点不能表示AZF区的全部范围,当临床表型与基因型不一致时,当AZF区部分缺失时,建议应用MLPA进一步验证,避免误诊。
【收藏此页】 【打印本页】 【关闭窗口】